饲料中粗脂肪的测定方法

粗脂肪是饲料中的一种重要物质。检测饲料中的粗脂肪含量有利于科学配比饲料，合理满足动物的能量需求，提高饲料的利用率。本文将介绍饲料中粗脂肪的测定方法。

原理

饲料中的粗脂肪是由不同类别的脂肪组成的。在测定过程中，酶水解把饲料中的脂肪转化为甘油和游离脂肪酸。然后通过萃取和干燥，将游离脂肪酸转化为甲酯。最后通过气相色谱法分析甲酯，计算出饲料中粗脂肪的含量。

仪器和试剂

（1）酶：试剂盒中含有脂肪酶。

（2）硫酸甲酯：含有少量的BHT防腐剂。

（3）盐酸：含有0.1M的盐酸。

（4）甲苯：用于粗脂肪的萃取。

（5）己烷：甲酯化前，用于去除甲苯。

（6）氢气（气体纯度≥9999%）：气相色谱仪所需。

（7）超纯水：用于实验室常规操作。

（8）蒸馏水：用于洗涤和稀释试样。

（9）质量浓度为4mg/mL的C19:0内标溶液。

（10）试管、移液管、烧杯、滤纸等。

方法

（1）将100g粉状饲料样品称取入脂肪分析容器中，加入2mL 盐酸和2mL 水，并进行浸泡3小时以上。

（2）通过滤纸将样品过滤并均匀分配在酶解瓶中。加入5mL酶用于酶解样品。

（3）加入5mL甲苯，热搅，静置至油水分离，取上层甲苯液，加入10mg氢氧化钠，并去除甲苯。

（4）加入2mL硫酸甲酯，3次充分混合，并保持常温酯化60min。

（5）加入10mL蒸馏水，并将样品萃取3次，每次取5mL萃取液，将所有萃取液合并；并通过十分子滤膜微孔过滤。

（6）过滤后的样品加入质量浓度为4mg/mL的C19:0内标溶液，稀释至适宜浓度，准备好待测样品溶液。

（7）在气相色谱仪上进行分析。

注意事项

（1）操作前要严格遵守实验室安全操作规程。

（2）注意样品中的各组分的含量水平，以选择合适的样品量进行分析。

（3）保持环境清洁，防止样品受到污染。

（4）在使用甲苯时，必须进行有机操作。

（5）在操作过程中，严格遵守操作阶段的要求，避免样本交叉污染。

结论

采用上述方法可以测定饲料中粗脂肪的含量。该方法简便、快捷，且准确性高。在实际应用中，可以根据需要进行合适的方法改进和优化，以适应不同精度和样品量的需要。